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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 紫外凝膠成像分析儀的操作流程是怎樣的?
準(zhǔn)備工作:
開啟電腦并打開相關(guān)成像軟件(不同廠家和型號(hào)的儀器,軟件可能不同)。
確保紫外凝膠成像分析儀已連接電源并處于正常工作狀態(tài),預(yù)熱一段時(shí)間(具體時(shí)長(zhǎng)可參考儀器說明書)。
放置樣品:
打開儀器的暗箱門(如果有),將電泳完畢且已染色的凝膠樣品小心地放置在樣品臺(tái)上,確保樣品放置平穩(wěn)且位置合適。例如,對(duì)于核酸凝膠樣品,通常將含有 DNA 或 RNA 條帶的凝膠放置在紫外透射光源對(duì)應(yīng)的位置;如果是蛋白質(zhì)凝膠樣品,可能需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的光源和放置方式。
選擇光源和設(shè)置參數(shù):
根據(jù)樣品類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,選擇合適的光源(如紫外光、可見光等)。例如,對(duì)于 EB 染色的核酸凝膠,通常選擇紫外光源;對(duì)于考馬斯亮藍(lán)染色的蛋白質(zhì)凝膠,可能選擇可見光光源。
設(shè)置相關(guān)參數(shù),如波長(zhǎng)(不同的染料或標(biāo)記物可能需要特定波長(zhǎng)的光來激發(fā)熒光)、照度(光的強(qiáng)度)、曝光時(shí)間等。這些參數(shù)的設(shè)置需要根據(jù)樣品的特性、染色情況以及預(yù)期的成像效果進(jìn)行調(diào)整。一般來說,初次使用時(shí)可以先嘗試使用默認(rèn)參數(shù)或參考儀器說明書中的建議值進(jìn)行拍攝,然后根據(jù)拍攝結(jié)果再進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
對(duì)焦與成像:
關(guān)閉暗箱門(如果有),通過儀器的調(diào)節(jié)裝置(如旋鈕、按鈕或軟件界面上的控制選項(xiàng)),緩慢調(diào)節(jié)鏡頭的焦距,使樣品在成像界面上清晰顯示。可以通過觀察實(shí)時(shí)顯示的圖像來判斷對(duì)焦是否準(zhǔn)確,圖像清晰且樣品的細(xì)節(jié)能夠清楚分辨時(shí),說明對(duì)焦完成。
確認(rèn)對(duì)焦清晰后,啟動(dòng)成像程序或按下相應(yīng)的拍攝按鈕,儀器開始記錄凝膠樣品的圖像。成像過程中要保持儀器穩(wěn)定,避免震動(dòng)或移動(dòng),以免影響圖像質(zhì)量。
圖像查看與分析(可選):
成像完成后,在電腦上的成像軟件中打開所拍攝的圖像,進(jìn)行查看和初步分析??梢愿鶕?jù)需要調(diào)整圖像的對(duì)比度、亮度、灰度等參數(shù),以便更清晰地觀察和分析樣品中的條帶或斑點(diǎn)。例如,通過測(cè)量條帶的強(qiáng)度、大小等參數(shù),來對(duì)核酸或蛋白質(zhì)的含量、分子量等進(jìn)行初步判斷。
如果軟件支持進(jìn)一步的分析功能,如分子量計(jì)算、密度掃描、定量分析等,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行相應(yīng)的操作和數(shù)據(jù)處理。
保存與導(dǎo)出數(shù)據(jù):
將拍攝的圖像和分析結(jié)果保存到電腦上指-定的位置,建議按照實(shí)驗(yàn)日期、樣品名稱等信息進(jìn)行命名,以便后續(xù)查找和使用。
根據(jù)需要,可以將圖像和數(shù)據(jù)導(dǎo)出為常見的文件格式(如 JPEG、TIFF、PDF 等),以便與他人共享或在其他軟件中進(jìn)行進(jìn)一步處理和報(bào)告撰寫。
清理與關(guān)閉儀器:
取出樣品,并清理樣品臺(tái)和儀器內(nèi)部(如果有殘留的凝膠或污漬),使用柔軟的紙巾或布輕輕擦拭,避免使用有機(jī)溶劑或尖銳物品,以免損壞儀器表面或內(nèi)部部件。
關(guān)閉光源(如紫外燈等)和儀器的電源開關(guān)。
最后關(guān)閉電腦。
不同型號(hào)和品牌的紫外凝膠成像分析儀在操作細(xì)節(jié)上可能會(huì)有所差異,因此在使用前務(wù)必仔細(xì)閱讀儀器的操作說明書,并在必要時(shí)參考廠家提供的培訓(xùn)資料或咨詢相關(guān)技術(shù)支持人員。此外,在操作過程中要注意安全,特別是在使用紫外光源時(shí),避免直接暴露在紫外線下,以免對(duì)眼睛和皮膚造成傷害。
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